Eficácia in sílico do florfenicol no tratamento de pododermatite infecciosa por Fusobacterium necrophorum em ovelhas / In sílico efficacy of florfenicol in the treatment of Fusobacterium necrophorum infectious pododermatitis in sheep

Objetivou-se comparar o efeito in silico do florfenicol nas doses de 20 e 30 mg/Kg em ovinos pelas vias intravenosa (IV) e intramuscular (IM), usando a modelagem PK/PD. Realizou-se uma simulação de Monte Carlo com base nos dados de concentração plasmática de um estudo publicado anteriormente. Calculou-se a área sob a curva (ASC) e as taxas de eficácia do florfenicol para os efeitos bacteriostático, bactericida e de erradicação bacteriológica. A dose de 20 mg/Kg IV demonstrou efeitos de erradicação de 100, 93 e 0% para CIM de 0,5, 1 e acima, respectivamente. O efeito bacteriostático foi de 99 e 90% para CIM de 4 e 2 µg/ml, enquanto o bactericida foi de 14% para CIM de 2 µg/ml. A dose de 30 mg/Kg IV apresentou 100% de erradicação para CIM de 1 µg/mL e 100% de efeito bactericida para CIM de 2 µg/mL. Há 100% de efeito bacteriostático em CIM de 4 µg/ml. As doses de 20 e 30 mg/Kg IM mostraram 100% de erradicação para CIM até 1 µg/mL e 0% para CIM maiores. O efeito bacteriostático foi mantido em 100% para uma CIM de 4 µg/mL em ambas as doses. Este estudo mostra o efeito de erradicação bacteriológica do florfenicol nas doses de 20 e 30 mg/Kg, IV e IM. Recomenda-se que seja feito um estudo de eficácia in vivo com a dose de 30mg/Kg IM em ovinos infectados por F. necrophorum com MIC superior a 2 µg/mL.

We aimed to compare the in silico effect of florfenicol at doses of 20 and 30 mg/Kg in sheep by intravenous (IV) and intramuscular (IM) routes, using PK/PD modeling. We performed a Monte Carlo simulation based on plasma concentration data from a previously published study. We calculated the area under the curve (AUC) and the efficacy rates of florfenicol to bacteriostatic, bactericidal, and bacteriological eradication effects. The dose of 20 mg/Kg IV demonstrated 100, 93, and 0% eradication effects for MICs of 0.5, 1, and above, respectively. The bacteriostatic effect was 99 and 90% for MIC of 4 and 2 µg/ml, while the bactericide was 14% for MIC of 2 µg/ml. The 30 mg/Kg IV dose showed 100% eradication for MIC of 1 µg/mL and 100% bactericidal effect for MIC of 2 µg/mL. There is a 100% of bacteriostatic effect at MIC of 4 µg/ml. Doses of 20 and 30 mg/Kg IM showed 100% eradication for MIC up to 1 µg/mL and 0% for MIC above. The bacteriostatic effect was maintained at 100% for a MIC of 4 µg/mL at both doses. This study shows the bacteriological eradication effect of florfenicol at doses of 20 and 30 mg/Kg, IV, and IM. Therefore, we recommend an in vivo efficacy study with a dose of 30mg/Kg IM in sheep infected with F. necrophorum with MIC greater than two µg/mL.

Diagnóstico bacteriológico de la tuberculosis. Estado actual del conocimiento Primera parte / Bacteriologic Diagnosis of Tuberculosis. Current State of Knowledge First part

Uno de los principales desafíos para los Programas de Control de Tuberculosis (PCT) lo constituye la detección temprana de formas abiertas de la enfermedad. La Organización Mundial de la Salud (OMS) ha estimado que el desarrollo de un método de diagnóstico de tuberculosis (TB) que ofreciera un 85% de sensibilidad y un 95% de especificidad sobre muestras de esputo permitiría salvar unas 400000 vidas al año. En condiciones ideales, sería necesario, además, que un método accesible y preciso, aplicado en colectivos de mayor vulnerabilidad, pudiera aportar tanto a la identificación de especie como a su perfil de resistencia, en especial si este implicara un mayor riesgo de fracaso terapéutico. En la última década, el desarrollo del sistema de diagnóstico GeneXpert MTB/RIF ha significado un gran avance en ese sentido. A un costo de USD 9,98 por determinación (en los 145 países subsidiados), el método permitió acercarse a los objetivos mencionados, es decir, la detección precoz de la TB y la detección de resistencia a rifampicina, usualmente tomada como un indicador de fracaso terapéutico.

Caracterización clínica y microbiológica de pacientes con trazas en Xpert MTB/RIF Ultra / Clinical and microbiological characterization of patients with Xpert MTB/RIF Ultra traces

INTRODUCCIÓN: El Xpert MTB/RIF Ultra (Ultra) ha mejorado dramáticamente el diagnóstico de la tuberculosis (TBC). Con él ha nacido la categoría de trazas, que es la menor carga bacilar detectable por este examen. OBJETIVO: Describir las características clínicas de los pacientes con presencia de trazas en el Ultra y evaluar la confirmación de la TBC como diagnóstico clínico. MATERIALES Y MÉTODOS: Estudio descriptivo de serie de casos. Se extrajo la información de fichas clínicas de pacientes con positividad a trazas. Se confrontaron datos clínicos, microbiológicos e histopatológicos. RESULTADOS: Se analizaron 21 pacientes. La edad promedio fue de 52 años. Todos los casos presentaron baciloscopias negativas. Cuatro cultivos en medio líquido MGIT fueron positivos, dos en pleura parietal, uno en líquido pleural y otro en expectoración. En pleura parietal, tres casos presentaron granulomas con necrosis caseosa y un granuloma esbozos de necrosis. En tejido pulmonar se observaron dos casos con granulomas con esbozos de necrosis y dos con granulomas no necrotizantes. Tres pacientes tenían el antecedente de TBC previa, se interpretó la positividad de trazas en ellos como falsos positivos. Finalmente se diagnosticaron 13 casos como TBC activa, donde cinco de ellos fueron TBC pleurales. La mayor concordancia clínica, microbiológica e histopatológica fue en muestras de líquido y tejido pleural. DISCUSIÓN: Se debe interpretar con cautela los hallazgos de esta prueba en muestras de vía aérea; el análisis multidisciplinario (clínica, imágenes, microbiología, histología) es crucial en las decisiones de nuestras conductas clínicas futuras. El hallazgo de trazas en pleura tiene, a nuestro parecer, un alto valor diagnóstico en el estudio de la tuberculosis en esta localización.

INTRODUCTION: Xpert MTB/RIF Ultra has dramatically changed the diagnosis of tuberculosis. A new category called traces appeared, which is the smallest amount of bacillar load detectable. OBJECTIVE: Describe the clinical characteristics of patients that present traces in Xpert MTB/RIF Ultra test, and to evaluate the confirmation of tuberculosis as clinical diagnosis. METHODS: We perform a descriptive case series study. Information was recovered from clinical records of patients with positive test for traces. Clinical, histopathological and microbiological results were confronted. RESULTS: Twenty one patients were analyzed. The mean age was 52 years-old. All cases had negative smear microscopy and four MGIT cultures were positive, two in pleural fluid and another in sputum. In parietal pleura, three cases presented granulomas with caseous necrosis, and one showed granuloma with very little necrosis. In pleural tissue we observed two cases of granulomas with traces of necrosis and two with non-necrotizing granulomas. Three patients had history of previous tuberculosis and positive traces, the test was interpreted as a false positive result. Finally, active tuberculosis was diagnosed in 13 cases, and five of them were pleural tuberculosis. The highest clinical, microbiological and histopathological agreement was in fluid and pleural tissue samples. DISCUSSION: The findings of Xpert MTB/RIF Ultra in airway samples must be interpreted carefully. Multi-disciplinary analysis is crucial in future clinical decisions. The finding of traces in pleura has, in our opinion, a high diagnostic value in the study of tuberculosis in this location.

Evaluación fisicoquímica y bacteriológica del agua del río chillón / Physicochemical and bacteriological evaluation of the Chillón river water

El agua es uno de los compuestos más importantes y abundantes del ecosistema. Todos los organismos vivos de la tierra necesitan agua para su supervivencia y crecimiento. Hasta ahora, sólo La Tierra es el único planeta que tiene alrededor del 70% de agua, pero de ella sólo un muy pequeño porcentaje (0,3%) es apta para el consumo humano. Adicionalmente, el aumento de la demanda de agua como consecuencia de la población crecimiento, agricultura y desarrollo industrial ha obligado a los ambientalistas a determinar las características químicas, físicas y biológicas de los recursos hídricos naturales. La calidad de los recursos hídricos depende en gran medida de parámetros físico-químicos y características biológicas. Evaluar el monitoreo de estos parámetros es esencial para identificar la magnitud y la fuente de cualquier carga contaminante. Estas características pueden identificar cierta condición para la ecología de los organismos vivos y sugerir estrategias apropiadas de conservación y manejo. La disponibilidad de agua de buena calidad es una característica indispensable para prevenir enfermedades y mejorar calidad de vida. En este artículo se evaluó la calidad del agua, desde el punto de vista fisicoquímico y bacteriológico del río Chillón ubicado a 130 km del sur de la ciudad de Lima, Perú. Los resultados concluyeron que el río Chillón, especialmente, aguas abajo, no cumple con los estándares de calidad establecidos según normativa. El cálculo de ICARHS fue de 35,40, lo que categoriza al río Chillón con aguas de pésima calidad. Con los resultados obtenidos, se recomienda a las autoridades e instituciones gubernamentales el apoyo a continuar con el monitoreo de aguas de los ríos como una herramienta eficaz para evaluar su estado ecológico, así como para la protección de su contaminación y de la salud humana(AU)

Water is one of the most important and abundant compounds in the ecosystem. All living organisms on earth need water for their survival and growth. Until now, only the Earth is the only planet that has about 70% water, but of it only a very small percentage (0.3%) is suitable for human consumption. Additionally, the increased demand for water as a result of population growth, agriculture, and industrial development has forced environmentalists to determine the chemical, physical, and biological characteristics of natural water resources. The quality of water resources depends largely on physical-chemical parameters and biological characteristics. Evaluating the monitoring of these parameters is essential to identify the magnitude and source of any contaminant load. The availability of good quality water is an essential feature to prevent diseases and improve quality of life. In this article, the quality of the water was evaluated from the physicochemical and bacteriological point of view of the Chillón River located 130 km south of the city of Lima, Peru. The results concluded that the Chillón River, especially downstream, does not meet the quality standards established according to regulations. The ICARHS calculation was 35.40, which categorizes the Chillón River as having poor quality water. With the results obtained, it is recommended that government authorities and institutions support the continuation of river water monitoring as an effective tool to assess their ecological status, as well as to protect against contamination and human health(AU)

Métodos diagnósticos para tuberculose: uma revisão integrativa / Diagnostic methods for tuberculosis: an integrative review

A tuberculose é doença muito prevalente, com 5,8 milhões de casos ao ano, podendo apresentar padrão multissistêmico de acometimento, sendo mais comum a forma pulmonar. Objetivo: Revisão de literatura acerca dos métodos existentes de diagnóstico da tuberculose, focada em suas eficácias. Método: Foi realizada revisão integrativa por meio de publicações de 2016 a 2022 obtidas na base de dados PubMed e Scielo. Foram usados os descritores: Mycobacterium tuberculosis AND diagnosis. Foram obtidos 14 artigos que satisfizeram os critérios de inclusão. Resultado: Das formas de diagnóstico existem exames de imagem (Raio-X e tomografia computadorizada), baciloscopia, cultura e moleculares. Conclusão: Os métodos por imagem têm relevância quando seus achados são correlacionados com a clínica e podem auxiliar no diagnóstico. Nos métodos bacteriológicos, o sistema do GeneXpert Ultra apresenta maior custo-benefício, com valores de sensibilidade e especificidade altos - acima de 90% - superior à baciloscopia, e com menor tempo para realização em comparação com a cultura

nd may present a multisystem pattern of involvement, with the pulmonary form being the most common. Objective: Literature review on existing methods used to diagnose tuberculosis. Method: An integrative review was carried out through publications from 2016 to 2022 in the PubMed and Scielo publication database. The descriptors were used: Mycobacterium tuberculosis AND diagnosis. Fourteen articles that met the inclusion criteria were obtained. Result: Among the ways of diagnosing tuberculosis, there are imaging tests (X-ray and computed tomography), bacilloscopy, culture and molecular tests. Conclusion: Imaging methods have their findings correlated and can aid in the diagnosis. In bacteriological methods, the GeneXpert Ultra system is cost-effective, with high sensitivity and specificity values - above 90% -, superior to bacilloscopy, with a shorter time to perform compared to culture

Wooden sticks for plaque streaking and microbiological inoculation might be more cost- effective, but is its large scale use feasible? Quality control methods and proof of concept / Métodos de controle de qualidade e prova de conceito para a utilização de palitos de madeira em microbiologia podem ser mais econômicas, mas seu uso em larga escala é viável? Método de controle de qualidade e prova de conceito

The loop is a material classically used in the laboratory for the purpose of plate streaking and handling biological materials. However, metal loops techniques might be time consuming, considering the amount of time spent to guarantee its cooling process through each inoculation. Furthermore, plastic loops may also represent environmental issues during its production and discard process and can also represent higher costs for the laboratory. Thus, in situations of limited resources, even the simplest materials can be restricted due to logistical and budgetary issues, especially in developing countries. Inspired by demands like these, facing an occasional shortage of supply of laboratory plastic handles, we hereby present a quality control for sterilization methods and cost-effectiveness studies towards the use of wooden sticks in a Latin American country and we discuss the possibility of the large-scale use of this technique.

A alça calibrada é um material usado classicamente em laboratório para fins de inoculação em placas e manuseio de materiais biológicos. No entanto, as técnicas de alças metálicas podem consumir muito tempo, considerando a quantidade de tempo gasto para garantir seu processo de resfriamento a cada inoculação. Além disso, alças de plástico também podem representar questões ambientais durante o processo de produção e descarte e também podem representar custos mais altos para o laboratório. Assim, em situações de recursos limitados, até os materiais mais simples podem ser restringidos devido a questões logísticas e orçamentárias, especialmente nos países em desenvolvimento. Inspirados por demandas como essas, diante de uma escassez ocasional de suprimentos de alças de plástico de laboratório, apresentamos um controle de qualidade para métodos de esterilização e estudos de custo-efetividade para o uso de varas de madeira em um país latino-americano e discutimos a possibilidade de grande uso em escala dessa técnica.

Demanda de culturas microbiológicas e prevalência de microrganismos em um hospital universitário de Pernambuco / Demand for microbiological cultures and prevalence of microorganisms in a university hospital of Pernambuco / Demanda de culturas microbiológicas y prevalencia de microrganismos en un hospital universitario de Pernambuco

Objetivo: verificar a demanda de hemoculturas, aspirados traqueais e uroculturas realizadas no HU-UNIVASF/ EBSERH e a prevalência dos microrganismos identificados no período de janeiro a junho de 2016. Métodos: estudo retrospectivo documental com abordagem quantitativa. Resultados: o setor de microbiologia realizou 488 hemoculturas, 427 uroculturas e 197 aspirados traqueais. A positividade de hemoculturas mostrou-se entre 10,9 à 25,7%, e o percentual de contaminações variou de 6,8 à 14,0%. Os microrganismos mais prevalência nas hemoculturas foram Staphylococcus epidermidis (23,7%), Staphylococcus aureus (19,3%) e Klebisiella pneumoniae (9,6%). Nas uroculturas foram Klebisiella pneumoniae (23,1%), Candida sp. (13,5%) e Escherichia coli (12,5%). Nos aspirados traqueais foram Acinetobacter baumannii (29,2%), Pseudomonas aeruginosa (26,6%) e Staphylococcus aureus (16,2%). Conclusão: a cultura mais solicitada foi hemocultura. A bactéria mais prevalente nas hemoculturas foi Staphylococcus epidermidis, nos aspirados traqueais Acinetobacter baumannii e nas uroculturas Klebisiella pneumoniae

Objective: the study's purpose has been to verify the demand for blood cultures, tracheal aspirates and urine cultures performed at a University Hospital from the Universidade Federal do Vale do São Francisco (HU-UNIVASF/EBSERH), as well as the predominance of microorganisms identified over the period from January to June 2016. Methods: it is a retrospective documentary study with a quantitative approach. Results: the microbiology sector carried out 488 blood cultures, 427 urine cultures and 197 tracheal aspirates. The positivity of blood cultures was between 10.9 and 25.7%, and the percentage of contaminations ranged from 6.8 to 14.0%. The most prevalent microorganisms in blood cultures were Staphylococcus epidermidis (23.7%), Staphylococcus aureus (19.3%) and Klebsiella pneumoniae (9.6%). In urine cultures were Klebsiella pneumoniae (23.1%), Candida sp. (13.5%) and Escherichia coli (12.5%). In tracheal aspirates were Acinetobacter baumannii (29.2%), Pseudomonas aeruginosa (26.6%) and Staphylococcus aureus (16.2%). Conclusion: the most requested culture was blood culture. The most prevalent bacterium in blood cultures was Staphylococcus epidermidis, in tracheal aspirates was Acinetobacter baumannii, and in urine cultures was Klebsiella pneumoniae

Objetivo: el propósito del trabajo es verificar la demanda de hemocultivos, aspirados traqueales y urocultivos realizados en el Hospital Universitário de la Universidade Federal do Vale do São Francisco (HU-UNIVASF/ EBSERH) y la prevalencia de los microorganismos identificados en el período de enero a junio de 2016. Métodos: este trabajo es un estudio retrospectivo documental con abordaje cuantitativo. Resultados: el sector de microbiología realizó 488 hemocultivos, 427 urocultivos y 197 aspirados traqueales. La positividad de hemocultivos se mostró entre el 10,9 al 25,7%, y el porcentaje de contaminaciones varía de 6,8 a 14,0%. Los microorganismos más prevalentes en los hemocultivos fueron Staphylococcus epidermidis (23,7%), Staphylococcus aureus (19,3%) y Klebsiella pneumoniae (9,6%). En los urocultivos fueron Klebisiella pneumoniae (23,1%), Candida sp. (13,5%) y Escherichia coli (12,5%). En los aspirados traqueales fueron Acinetobacter baumannii (29,2%), Pseudomonas aeruginosa (26,6%) y Staphylococcus aureus (16,2%). Conclusión: la cultura más solicitada fue hemocultivo. La bacteria más prevalente en los hemocultivos fue Staphylococcus epidermidis, en los aspirados traqueales, Acinetobacter baumannii y en los urocultivos, Klebisiella pneumoniae

A Study of Bacteriological Quality of Street-Hawked Milk in Ilesha Metroplolis, Osun State, Nigeria

Milk, a nutrient-rich liquid food produced in the mammary glands of mammals, contains low bacterial counts when it leaves the udder, but it may get contaminated from the environment, exterior of udder, water, soil, milkers' hands and utensils. Contamination can serve as a source of spread of certain harmful human bacterial diseases like tuberculosis, diphtheria, salmonellosis and food poisoning if consumed in raw form. This study, therefore, was designed to evaluate bacteriological quality of milk samples collected from various localities within Ilesha metropolis. MATERIALS AND METHODS Twenty (20) samples of fresh raw milk were collected in sterilized bottles from various nomadic milk hawkers in Ilesha. Methylene blue reductase test, standard plate count on standard plate count agar and isolation of possible pathogens using selective culture media was carried out on the samples. RESULTS Of the 20 samples of raw milk collected for bacteriological analysis, 3 samples were found to be of excellent quality, 5 were very good, 4 were good, 5 were fair and 3 were of poor quality. The actual standard plate count for excellent and very good quality ranged between 33-54 and 62 - 80 colony forming units (cfu). The organisms isolated and biochemically characterized from the raw milk samples were found contaminated with Escherichia coli (4 strains), Staphylococcus aureus (8 strains), Streptococcus pyogenes (5 strains), Streptococcus agalactiae (3 strains) and Enterobacter aerogenes (5 strains). African Journal of Health Sciences Volume 34, Issue No.4, July- August 2021 476 CONCLUSION The results obtained from this study showed that the milk sold in raw form could be hazardous to human health if sold without adopting hygienic measures

Qualidade bacteriológica e físico-química da carne bovina moída comercializada em supermercados e casas atacadistas no município de Belém/PA / Bacteriological and physical and chemical quality of milled beef commercialized in supermarkets and wholesalers in the city of Belém/PA

O trabalho objetivou avaliar a qualidade bacteriológica e físico-química da carne bovina moída comercializada em estabelecimentos de Belém/PA, bem como avaliar o nível de conformidade higiênico-sanitária do local quanto à comercialização e manipulação do alimento. Foram coletadas 2 amostras de carne moída em cada estabelecimento (uma pré-moída e outra moída no momento da coleta), sendo 3 supermercados e 3 casas atacadistas, totalizando 12 amostras. Estas foram submetidas à Contagem de Bactérias Heterotróficas Aeróbias Mesófilas (CBHAM); Número Mais Provável (NMP) de Coliformes Totais (CT) e Termotolerantes (C45); Contagem de Staphylococcus spp. e Enterobactérias, bem como determinação do potencial Hidrogeniônico (pH), determinação de amônia através do método de Nessler, prova de cocção, de filtração e aferição da temperatura externa da carne no momento da coleta. Concomitante a isso, avaliou-se os locais de comercialização quanto a manipulação e armazenamento através de uma lista de verificação. Foi constatada a presença de CT, C45, CBHAM, Staphylococcus spp. e Enterobactérias em 100% das amostras analisadas, com níveis máximos de >1100 NMP.g-1, >1100 NMP.g-1, 8,38, 5,26 e 5,91 LogUFC.g-1, respectivamente. As médias encontradas no pH e tempo de filtração foram de 5,31±0,07 e 06:51 minutos, na devida ordem. Em relação ao teste Nessler, 83,33% (n=10) das amostras apresentaram resultado positivo. Todas as amostras apresentaram temperaturas acima do preconizado pela legislação vigente. Observou-se que 5 dos estabelecimentos apresentaram médio atendimento aos itens avaliados a partir da lista de verificação. Esses dados comprovam que a carne bovina moída está em condições higiênico-sanitárias insatisfatórias, podendo acarretar riscos à saúde dos consumidores.

The aim of this study was to evaluate the bacteriological and physicochemical quality of ground meat marketed in Belém/PA establishments, as well as to evaluate the level of hygienic-sanitary compliance of the establishments regarding the commercialization and manipulation of food. Twenty samples of ground meat were collected from each establishment (one pre-ground and another ground at the time of collection), 3 supermarkets and 3 wholesale homes, totaling 12 samples. These were submitted to the Count of Mesophilic Aerobic Heterotrophic Bacteria (CBHAM); Most Likely Number (MPN) of Total Coliforms (CT) and Thermotolerant (C45); Staphylococcus spp. and Enterobacteria count, as well as determination of hydrogenionic potential (pH), ammonia determination through the Nessler method, cooking test, filtration and measurement of the external temperature of the meat at the time of collection. Concomitantly, the places of commercialization were evaluated for handling and storage through a checklist. CT, C45, CBHAM, Staphylococcus spp. and Enterobacteria were observed in 100% of the samples analyzed, with maximum levels of >1100 NMP.g-1, >1100 NMP.g-1, 8.38, 5.26 and 5.91 LogUFC.g-1, respectively. The means found in pH measurement and filtration time were 5.31±0.07 and 06:51 minutes, in proper order. Regarding the Nessler test, 83.33% (n=10) of the samples presented positive results. All samples showed commercialization temperatures above that recommended by current legislation. It was observed that 5 of the establishments presented average compliance to the items evaluated from the checklist. These data prove that ground meat is in unsatisfactory hygienic-sanitary conditions, which may pose risks to the health of consumers.

Características bacteriológicas, físicas y pH del agua de consumo humano del municipio de Une-Cundinamarca / Bacteriological and physical characteristics and pH of water for human consumption in the municipality of Une-Cundinamarca

Resumen Objetivo. Determinar características bacteriológicas, físicas y pH del agua para consumo humano que abastece al municipio de Une, Cundinamarca-Colombia. Métodos. Se tomaron 13 muestras de agua: 10 de la zona rural y 3 de la zona urbana. Del total de muestras tomadas en la zona rural, 7 no tenían ningún tratamiento, mientras que 3 tenían algún tipo de tratamiento. Las 3 muestras tomadas en la cabecera municipal, todas tenían tratamiento. Se utilizó la técnica de filtración por membrana para los análisis bacteriológicos, y los métodos nefelométrico, turbidimétrico y potenciométrico, para los análisis físicos y el pH. Resultados. Se obtuvo como resultado pH inferior a 6; 12 puntos superan el valor máximo de turbiedad y 5 puntos para la determinación de color. Se observó la presencia de Coliformes totales, E. coli y Enterococcus en las muestras analizadas, en cantidad que sobrepasa lo establecido en la normativa colombiana.

Abstract Objective. To determine bacteriological and physical characteristics and pH of water for human consumption that supplies the municipality of Une, Cundinamarca-Colombia. Methods. Thirteen water samples were taken: 10 from the rural area and 3 from the urban area. Of the total number of samples taken in the rural area, 7 had no treatment at all, while 3 had some type of treatment. The 3 samples taken in the municipal capital, all had treatment. The membrane filtration technique was used for bacteriological analysis and the nephelometric, turbidimetric and potentiometric methods for physical analysis and pH. Results. The result was pH lower than 6; 12 points exceed the maximum value turbidity and 5 points for the determination of color. The presence of total Coliforms, E. coli and Enterococcus was observed in the analyzed samples, in an amount that surpasses the established in the Colombian regulations.

Desarrollo de marcadores moleculares del tipo SCAR para la identificación de Azospirillum brasilense Az39 / Development of sequence characterized amplified región markers for identification of Azospirillum brasilense Az39

Resumen Azospirillum brasilense Az39 es utilizada por empresas productoras de inoculantespara la formulación de bioinsumos en América del Sur desde hace más de 30 a˜nos. Esta cepapuede promover el crecimiento, desarrollo, así como la capacidad de tolerar diferentes tiposde estrés en las plantas inoculadas, lo que determina un aumento de la productividad de culti-vos de interés agronómico. En la actualidad, no existen protocolos en Argentina que permitanconfirmar la identidad de Az39 en productos comerciales a nivel de laboratorios de control decalidad de inoculantes. Por ello, el objetivo de este trabajo fue desarrollar una metodología enbase molecular que permita la identificación certera de A. brasilense Az39. Con la secuenciacompleta del genoma y mediante herramientas bioinformáticas, se pudieron reconocer frag-mentos de ADN presentes únicamente en el genoma de Az39. Se dise˜naron cebadores dirigidosa amplificar por PCR dichas secuencias. Como resultado se observaron los productos específicosúnicamente en la presencia de la cepa de interés. La reacción pudo detectar un título mínimode 105UFC/ml (4,5 ng/l ADN) o de 102UFC/ml (0,88 ng/l ADN) o una concentración mínimade 0,098 ng/l ADN, dependiendo del método de extracción utilizado. Los cebadores fueronevaluados en el análisis de productos comerciales obtenidos del mercado nacional, arrojandoresultados positivos, tanto en muestras directas como así también en pruebas confirmatoriasa partir de colonias aisladas de tales productos. La metodología desarrollada en este trabajo,permite la detección certera de A. brasilense Az39 en cultivos puros o mezclas complejas demicroorganismos.

Abstract Azospirillum brasilense Az39 has been used since more than 30 years by several companies in South America for biofertilizers production. This strain may promote plants growth and development, as well as the ability of inoculated plants to tolerate environmental stresses, which determines an increase in the productivity under field conditions. At present, there are no protocols in Argentina to confirm the identity of Az39 in commercial products; however, such biofertilizers are formulated almost exclusively with this strain. Therefore, the objective of this paper was to develop a molecular methodology that allows the accurate identification of A. brasilense Az39. Using the complete genome sequence and several bioinformatics tools, fragments of DNA present only in the Az39 genome were recognized. A set of PCR primers to amplify these sequences were designed, and the specific products were observed only in the strain of our interest. The sensitivity of the methodology was evaluated, where the strain could be detected up to a titer of 105 CFU/ml (4.5 ng/pl ADN) or 102 CFU/ml (0.88 ng/pl DNA) or in a minimal concentration of 0.098 ng/pl DNA, depending on the DNA extraction methodology used. Primers were tested against direct samples of commercial inoculants and cultures, in both cases there were specifics products, both in direct samples and in confirmatory tests from isolated colonies from those products. The procedure presented in this paper allows the accurate identification of A. brasilense Az39 in pure cultures, mixtures of microorganisms, and commercial biofertilizers.

Detection of virulence factors in coagulase-negative Staphylococcus spp. strains isolated from Emmental cheese / Detecção de fatores de virulência em cepas de Staphylococcus spp. coagulase negativos isoladas de queijo Emmental

Food prepared with products derived from animals are involved in most cases of staphylococcal poisoning; therefore, the research of Staphylococcus spp. in Emmental cheese is more applicable. The objective of this study was to identify coagulase-negative Staphylococcus spp. (CNS) in cheese using biochemical and molecular techniques to detect the presence of nine genes responsible for the production of enterotoxins. From 180 samples analyzed, 204 CNS strains were obtained and identified as being 46 (22.6%) S. saprophyticus strains, 27 (13.2%) S. hominis spp. hominis strains, 22 (10.8%) S. sciuri strains, 21 (10.3%) S. xylosus strains, 19 (9.3%) S. epidermidis strains, 19 (9.3%) S. haemolyticus strains, 17 (8.3%) S. lentus strains, 17 (8.3%) S. warneri strains, 11 (5.4%) S. equorum strains and 5 (2.5%) S. cohnni . Using the PCRm protocol, 14 (6.9%) strains with the presence of the genes on the enterotoxin E (SEE)11 (78.6%), J (SEJ) 1 (7%), C (SEC) 1 (7%) and I (SEI) 1 (7%) were detected. Based on the results, the type of package is not interfered of growth and isolated that Staphylococcus spp. in cheese. It was observed that bacteria capacity to produce coagulase cannot be understood as an indicative of enterotoxigenicity; therefore, the CNS should be considered as a target of importance in the epidemiology of staphylococcal intoxications. It can be concluded that CNS need to be included in bacterial foodborne disease research, since the genes responsible for the production of toxins were detected and none of the studied samples presented Staphylococcus spp. counting above the limits allowed by legislation.(AU)

Os alimentos preparados com produtos de origem animal são os mais envolvidos em casos de intoxicação alimentar estafilocócica; portanto a pesquisa do Staphylococcus spp. em queijos tipo Emmental é relevante. O objetivo foi isolar e identificar espécies de Staphylococcus coagulase negativas (CNS)de queijo Emmental acondicionado em vários tipos de embalagem, por meio de técnicas bacteriológicas e bioquímicas e detectar, por PCR, a presença de nove genes responsáveis pela produção de enterotoxinas. Das 180 amostras, foram isoladas 204 cepas de CNS, que foram identificadas por provas bioquímicas como: 46 (22,6%) S. saprophyticus, 27 (13,2%) S. hominis spp. hominis, 22 (10,8%) S. sciuri, 21 (10,3%) S. xylosus, 19 (9,3%) S. epidermidis , 19 (9,3%) S. haemolyticus , 17 (8,3%) S. lentus , 17 (8,3%) S. warneri , 11(5,4%) S. equorum e 5 (2,5%) S. cohnii . Na PCR multiplex, em 14 (6,9%) isolados foi detectada a presença dos genes para enterotoxina E (SEE), em 11 (78,6%) J (SEJ), em 1 (7%) C (SEC) e em 1 (7%) I (SEI). Com base nos resultados, o tipo de embalagem não interferiu na multiplicação dos Staphylococcus spp. isolados dos queijos. Neste estudo, verificou-se que a capacidade para a produção de coagulase pela bactéria não pode ser concebida como indicativa de enterotoxigenicidade, portanto devem-se considerar os CNS como objeto de importância na epidemiologia das intoxicações estafilocócicas, fazendo-se necessária a atenção com relação à pesquisa dos CNS nos alimentos, uma vez que foram detectados genes responsáveis pela produção de toxinas, e nenhuma das amostras apresentou contagem para Staphylococcus spp. acima do limite permitido pela legislação.(AU)

Fatores associados à cura e ao abandono do tratamento da tuberculose na população privada de liberdade / Factors associated with recovery and the abandonment of tuberculosis treatment in the incarcerated population

RESUMO: Objetivo: Este estudo objetivou investigar os fatores associados aos desfechos de cura e abandono na população privada de liberdade com tuberculose. Métodos: Estudo quantitativo, observacional e analítico. Realizado com dados oriundos do Sistema de Informação de Agravos de Notificação (Sinan), de tuberculose da população privada de liberdade nos anos de 2007 a 2016 no estado da Paraíba. Foram incluídas as notificações de indivíduos maiores de 18 anos notificados como "casos novos" e como encerramento por "cura" ou "abandono". Excluíram-se aqueles que até dezembro de 2016 não tinham a situação de encerramento. Realizaram-se estatísticas bivariada e multivariada, por meio de regressão de Poisson. Resultados: Com 614 notificações, a maioria foi do sexo masculino (93,8%). Na análise bivariada, houve associação estaticamente relevante dos desfechos com síndrome da imunodeficiência adquirida (p = 0,044), sorologia para vírus da imunodeficiência humana (p = 0,048) e não realização de baciloscopia de acompanhamento (p = 0,001). Na análise multivariada ajustada, a síndrome da imunodeficiência adquirida (risco relativo - RR = 1,998; intervalo de confiança de 95% - IC95% 1,078 - 3,704; p = 0,028) e a não realização de baciloscopia de acompanhamento (RR = 5,211; IC95% 2,158 - 12,583; p < 0,001*) permaneceram significativamente associadas ao desfecho de abandono. Conclusão: Os desfechos de cura e abandono estão associados principalmente com a realização ou não da baciloscopia de acompanhamento e com a síndrome da imunodeficiência adquirida.

ABSTRACT: Objective: This study aimed to investigate the factors associated with the outcomes of recovery and abandonment in the incarcerated population with tuberculosis. Methods: A quantitative and observational analytical study was performed with data from the Notification Disease Information System (Sinan), tuberculosis data from the incarcerated population in the state of Paraiba from 2007 to 2016; Notifications of individuals over the age of 18, reported as "new cases" and the outcome, "recovery" or "abandonment" status were included. Those people who until December 2016 had no outcome information were excluded. Analyses were performed using bivariate and multivariate statistics from the Poisson regression. Results: Of the 614 notifications, most were male (93.8%). In the bivariate analysis, there was a statistically relevant association of outcomes with Acquired Immunodeficiency Syndrome (p = 0.044), Human Immunodeficiency Virus (HIV) serology (p = 0.048) and lack of completion of follow-up bacilloscopy (p = 0.001). In the adjusted multivariate analysis, Acquired Immunodeficiency Syndrome (RR = 1.998; 95%CI 1.078 - 3.704; p = 0.028) and lack of completion of follow-up bacilloscopy (RR = 5.251; 95%CI 2.158 - 12.583; p <0.001*) remained significantly associated with the dropout outcome. Conclusion: Recovery and abandonment outcomes were mainly associated with whether the follow-up bacilloscopy was performed or not and Acquired Immunodeficiency Syndrome.

Establishment and evaluation of multiplex PCR for detection of main pathogenic bacteria of endometritis in Tibetan sheep / 生物工程学报

A multiplex PCR method was developed to detect the main pathogens of Qinghai Tibetan sheep endometritis. First, the genomes of five standard bacterial strains were extracted and specific primers were selected; the multiplex PCR method was established by using the genome of the standard strain as a template. The samples were collected by sterile cotton swab from Tibetan sheep uterus, and then placed in LB medium and numbered. After 48 h, the genomes of cultured bacteria were extracted and detected by single PCR method, then the positive samples were recorded. The positive samples detected by single PCR were selected for multiplex PCR detection and recorded again. The coincidence rate between these two methods was calculated to measure the accuracy of multiplex PCR. In order to identify the species of the pathogen, 30 positive samples verified by single and multiplex PCR were randomly selected for bacterial isolation and identification. In the 600 samples, the infected ratio of Streptococcus agalactiae (GBS) was 47.33%, Escherichia coli 34.83%, Staphylococcus aureus 6.5%, Salmonella and Trueperella pyogenes were negatively detected. Among the positive samples detected by multiplex PCR, the positive ratio of GBS was 45.50%, E. coli 33.50%, S. aureus 6.5%. Comparison of two detection results, Multiplex PCR detection coincidence rate is more than 95%. The isolated pathogens were identified as E. coli, GBS and S. aureus, which was consistent with the results of two methods. The multiplex PCR method was successfully established and the main pathogens of endometritis in Qinghai Tibetan sheep were GBS, E. coli and S. aureus.

Biochemical identification techniques and antibiotic susceptibility profile of lipolytic ambiental bacteria from effluents / Técnicas de identificação bioquímica e perfil de suscetibilidade antibiótica de bactérias ambientais lipolíticas de efluentes

Abstract Different methodologies have been developed throughout the years to identify environmental microorganisms to improve bioremediation techniques, determine susceptibility profiles of bacteria in contaminated environments, and reduce the impact of microorganisms in ecosystems. Two methods of bacterial biochemical identification are compared and the susceptibility profile of bacteria, isolated from residential and industrial wastewater, is determined. Twenty-four bacteria were retrieved from the bacteria bank of the Environmental Microbiology Laboratory at the Institute of Biology (IB) of the Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, Brazil. Bacteria were identified by conventional biochemical tests and by the VITEK ®2 automated system. Further, the susceptibility profile to antibiotics was also determined by the automated system. Six species of bacteria (Raoutella planticola, K. pneumoniae ssp. pneumoniae , Serratia marcescens, Raoutella sp., E. cloacae and Klebsiella oxytoca) were identified by conventional biochemical tests, while three species of bacteria (K. pneumoniae ssp. pneumoniae, S. marcescens and K. oxytoca ) were identified by VITEK®2 automated system. VITEK ®2 indicated agreement in 19 (79.17%) isolates and difference in five (20.83%) isolates when compared to results from conventional biochemical tests. Further, antibiotic susceptibility profile results showed that all isolates (100%) were resistant to at least one out of the 18 antibiotics tested by VITEK®2. Thus, no multi-resistant bacteria that may be used in effluent treatment systems or in bioremediation processes have been reported. Results indicate VITEK ® 2 automated system as a potential methodology in the determination of susceptibility profile and identification of environmental bacteria.

Resumo Diferentes metodologias foram desenvolvidas ao longo dos anos para identificar microrganismos ambientais para melhorar as técnicas de biorremediação, determinar perfis de suscetibilidade de bactérias em ambientes contaminados e reduzir o impacto de microrganismos nos ecossistemas. Dois métodos de identificação bioquímica bacteriana são comparados e o perfil de susceptibilidade de bactérias, isoladas de efluentes residenciais e industriais, é determinado. Vinte e quatro bactérias foram coletadas do banco de bactérias do Laboratório de Microbiologia Ambiental do Instituto de Biologia (IB) da Universidade Federal de Pelotas, Pelotas, Brasil. As bactérias foram identificadas por testes bioquímicos convencionais e pelo sistema automatizado VITEK®2. Além disso, o perfil de suscetibilidade aos antibióticos também foi determinado pelo sistema automatizado. Seis espécies de bactérias (Raoutella planticola , K. pneumoniae ssp. pneumoniae, Serratia marcescens, Raoutella sp., E. cloacae e Klebsiella oxytoca) foram identificadas por testes bioquímicos convencionais, enquanto três espécies de bactérias (K. pneumoniae ssp. pneumoniae, S. marcescens e K. oxytoca) foram identificados pelo sistema automatizado VITEK®2. VITEK®2 indicou concordância em 19 (79,17%) isolados e diferença em cinco (20,83%) isolados quando comparados aos resultados de testes bioquímicos convencionais. Além disso, os resultados do perfil de suscetibilidade aos antibióticos mostraram que todos os isolados (100%) foram resistentes a pelo menos um dos 18 antibióticos testados pelo VITEK®2. Assim, não foram relatadas bactérias multirresistentes que possam ser usadas em sistemas de tratamento de efluentes ou em processos de biorremediação. Os resultados indicam que o sistema automatizado VITEK ® 2 é uma metodologia potencial na determinação do perfil de suscetibilidade e identificação de bactérias ambientais.

Efectos del medio de cultivo y de la metodología aplicada sobre la formación de biopelículas de 2 cepas de Escherichia coli diarreagénicas / Effects of the culture medium and the methodology applied on the biofilm formation of 2 diarrheagenic Escherichia coli strains

La capacidad de formar biopelículas de los microorganismos patógenos en gran variedad de ambientes, superficies y condiciones trae consigo un importante riesgo, tanto para la industria alimentaria como para la salud pública. Este trabajo tuvo como objetivo evaluar y comparar los efectos de la metodología empleada y de los medios de cultivo utilizados, sobre la capacidad de una cepa de Escherichia coli verotoxigénica no O157 y una enteropatogénica de formar biopelículas sobre una superficie de poliestireno. Se ensayaron 2 variantes metodológicas en cultivo estático y se utilizaron medios de cultivo con diferente composición. Los resultados mostraron que ambas cepas formaron una mayor cantidad de biopelícula en cultivo en LB suplementado con glucosa, con recambio del medio a las 24 h y la cuantificación de la biopelícula realizada a las 48 h de incubación. Dichas condiciones podrían ser utilizadas en futuros estudios sobre formación de biopelícula.

The ability to form biofilms of pathogenic microorganisms in a wide variety of environments, surfaces and conditions constitute an important risk, both for the food industry and for public health. The aim of this work was to evaluate and to compare the effects of the methodology applied and the culture medium used on the ability of a non-O157 verotoxigenic Escherichia coli strain and an enteropathogenic strain to form biofilm on polystyrene surface. Two methodological variants were tested in static culture and culture mediums with different composition were used. The results showed that both strains were able to form a greater biofilm under culture in LB supplemented with glucose, with medium replacement at 24 h and the quantification of the biofilm carried out at 48 h of incubation. These conditions could be used in future studies on biofilm formation.

Identification of Brucella abortus biovar 4 of bovine origin in Colombia / Identificación de Brucella abortus biovar 4 de origen bovino en Colombia

The objective of this study was to identify twelve Brucella abortus isolates of bovine origin from the department of Nariño in Colombia up to the biovar level. These isolates are included in the collection of the Germplasm Bank of Microorganisms of Animal Health Interest -Bacteria and Virus (BGSA-BV). The identification was carried out through conventional methods such as macro and microscopic morphological descriptions, enzymatic activity, biochemical profile, substrate use and sensitivity to dyes. Complementary genotypic characterization was carried out using multiplex PCR for B. abortus, Brucella melitensis, Brucella ovis, and Brucella suis-Erytritol (AMOS-ERY-PCR), RFLP-IS711, by southern blot hybridization, as well as by the multiple locus variable number of tandem repeat analysis (MLVA) using the ery gene and the insertion sequence IS711 and variable number of tandem repeats (VNTR) as molecular markers. The results of the phenotypic and molecular characterization allowed to identify twelve isolates as B. abortus biovar 4 as well as to differentiate field from vaccine strains. This is the first study on the phenotypic and molecular identification of B. abortus isolates in Colombia. It was concluded that the phenotypic and molecular identification of twelve isolates as B. abortus biovar 4 could be achieved using conventional and molecular techniques with enough resolution power. The identification of these isolates to the biovar level in taxonomic and epidemiological terms will allow the use of this genetic resource as reference strains in future research. This finding constitutes the basis for identifying biotypes not previously reported in the country that might be useful to support brucellosis survey programs in Colombia.

El objetivo de este estudio fue identificar 12 aislamientos de Brucella abortus de origen bovino procedentes del departamento de Narino, Colombia, hasta la descripción de biovar. Estos aislamientos conforman la colección del Banco de Germoplasma de Microorganismos de Interés en Salud Animal, Bacterias y Virus. La identificación se hizo mediante métodos convencionales, como la descripción morfológica macro y microscópica de actividad enzimática, de perfiles bioquímicos, de utilización de sustratos y de sensibilidad a colorantes. Se hizo una caracterización genotipica complementaria mediante PCR múltiple para Brucella abortus, Brucella melitensis, Brucella ovisy Brucella suis-eritritol (AMOS-ERY-PCR); RFLP-/S7II; hibridación Southern blot y análisis multi-locus de repeticiones en tándem de número variable (MLVA), empleando como marcadores moleculares el gen ery, la secuencia de inserción /S711 y el número variable de repeticiones en tándem (VNTR). Los resultados de la caracterización fenotípica y molecular permitieron identificar 12 aislamientos de campo como B. abortus biovar 4 y diferenciar cepas de campo de cepas vacunales. Este es el primer estudio de identificación fenotípica y molecular de aislamientos de B. abortus en Colombia. Por su importancia taxonómica y epidemiológica, la identificación de estos aislamientos hasta el nivel de biovar permitirá disponer de recursos genéticos que se pueden emplear como cepas de referencia en futuras investigaciones. Estos resultados pueden considerarse como una base para la identificación de biotipos no reportados en el país y podrán ser utilizados en programas de monitoreo y vigilancia de la brucelosis bovina en Colombia.

Desarrollo y evaluación de una base de datos in house para la identificación rápida de Burkholderia contaminons por EM MALDI-TOF / Development and evaluation of an in-house database for quick identification of Burkholderia contaminans by MALDI-TOF MS

La espectrometría de masas (EM) (matrix assisted laser desorption ionization-time of flight) MALDI-TOF demostró ser una herramienta robusta para la identificación de numerosos grupos taxonómicos. No obstante, presenta limitaciones. Una ventaja clave de la técnica es la flexibilidad para la incorporación de espectros proteicos de microorganismos ausentes en la base de datos comercial. Dada la prevalencia de Burkholderia contaminans en los pacientes fibroquísticos en Argentina, y a que en ellos es crucial el diagnóstico microbiológico rápido y confiable, la EM MALDI-TOF surge como una herramienta estratégica. El objetivo del trabajo fue desarrollar una base de datos adicional con espectros peptídicos de aislamientos de referencia de B. contaminans. La misma demostró ser exitosa para la identificación del 97% de los aislamientos analizados. Por lo cual la EM MALDI-TOF con la base de datos extendida resultó ser una herramienta útil para la identificación y diferenciación de otras especies relacionadas a B. contaminans.

MALDI-TOF (matrix assisted laser desorption ionization-time of flight) mass spectrometry (MS) proved to be a robust tool for the identification of numerous taxonomic groups. However, it has limitations. A key advantage of this technique is the flexibility for the incorporation of protein profiles of microorganisms not included in the commercial database. Due to the prevalence of Burkholderia contaminans in fibrocystic patients in Argentina and the fact that rapid and reliable microbiological diagnosis is crucial in them, MALDI-TOF MS emerges as a strategic tool. The aim of this work was to develop an additional database with peptide spectra of reference isolates of B. contaminans. This database demonstrated to be successful for the identification of 97% of the isolates analyzed. Therefore, MALDI-TOF MS with the extended database was a useful tool for the identification and differentiation of other related species to B. contaminans.

Análise das condições microbiológicas de tábuas de corte utilizadas na preparação de alimentos em escolas públicas do município de Paraipaba - CE / Analysis of microbiological conditions of cutting tablets used in the foods preparation in public schools of the municipality of Paraipaba - CE

É durante o processamento de alimentos que aumentam as chances de contaminação, por isso é importante manter o controle de qualidade e preparo adequado. Assim, o presente trabalho tem como objetivo avaliar as condições microbiológicas de tábuas de corte utilizadas na preparação de alimentos em escolas públicas do município de Paraipaba (CE). O estudo foi realizado em 7 escolas da rede pública, no período de outubro a novembro de 2018. Por meio da técnica do swab e o uso de um delimitador de espaço de 50 cm2 foram coletadas 7 amostras de tábuas de corte. As amostras foram submetidas as análises de aeróbios mesófilos e coliformes à 45 °C. Das tábuas analisadas, 72% apresentaram níveis insatisfatórios para aeróbios mesófilos e 14% para Coliformes à 45 °C, evidenciando assim a necessidade de adequação às Boas Práticas de Fabricação (BPF) e treinamentos periódicos do manipulador para garantia de alimentos seguros.

Análise de riscos à saúde pública de sashimis vendidos em estabelecimentos de comida japonesa no município de Marabá-PA / Analysis of public health risks of sashimis sold at japanese food establishments in the municipality of Marabá-PA

O peixe está entre os produtos de origem animal mais susceptíveis ao processo de deterioração. Devido ao grande aumento no consumo de sashimi, o objetivo do estudo foi avaliar os riscos à saúde pública relacionado ao consumo dessa iguaria. Para essa avaliação foram pesquisados os seguintes microrganismos: Coliformes termotolerantes, Escherichia coli, Staphylococcus aureus e Salmonella spp. A porcentagem de conformidade dos estabelecimentos variaram de 85,7% a 59,5%. Os resultados indicaram condições satisfatórias para Staphylococcus coagulase positiva e Salmonellaspp., em conformidade com os padrões microbiológicos estabelecidos pela legislação. Quanto a contagem de coliformes termotolerantes e Escherichia coli, notou-se que os sashimis em um dos estabelecimentos não estava de acordo com o que a legislação preconiza.